Fevereiro 2015 vol. 1 num. 2 - XX Congresso Brasileiro de Engenharia Química

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AVALIAÇÃO E CARCATERIZAÇÃO DE ERITROPOETINA HUMAN RECOMBINANTE

MARINHO, A. C. M. ; CONCEIÇÃO, C. M. ; SILVA, F. S. Q. da ; GIMENES, M. A. P. ;

Artigo:

A eritropoetina humana recombinante (EPO-hr) é uma das glicoproteínas terapêuticas mais utilizadas em todo o mundo. A caracterização estrutural detalhada de glicoproteínas deve ser realizada para avaliar a reprodutibilidade lote a lote. Este estudo objetivou caracterizar e avaliar um lote (Lote A) de ingrediente farmacêutico ativo (IFA) de EPO-hr, mediante determinação de concentração de proteínas, massa molar, perfil de isoformas e pureza, utilizando absorção no UV, SDS-PAGE, 2D-PAGE e CLAE-FR, respectivamente. O sequenciamento peptídico foi determinado por espectrometria de massas com fonte de ionização do tipo electrospray e analisadores quadrupolo e TOF (EM-ESI-QTOF). A concentração protéica obtida para o lote A foi de 1,1 mg/mL, massa molar por SDS-PAGE de 40 kDa. O resultado obtido para 2D-PAGE evidenciaram 6 isoformas majoritárias entre pI 4,5 e 6,5. Para o ensaio de pureza, foi encontrado o percentual médio de 99%. Pela técnica EM-ESI-QTOF foi possível identificar o sítio de O-glicosilação na serina. Pode-se, também, inferir que este sítio de O-glicosilação contém o fragmento HexNAc, pois há um incremento de massa de 203 Da entre o íon detectado com modificação e sem modificação. Sendo assim, os resultados obtidos com as diferentes metodologias visando o controle de qualidade e/ou controle em processo possibilitaram um maior entendimento das amostras de IFA de EPO-hr.

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Palavras-chave:

DOI: 10.5151/chemeng-cobeq2014-1077-21197-141617

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Como citar:

MARINHO, A. C. M.; CONCEIÇÃO, C. M.; SILVA, F. S. Q. da; GIMENES, M. A. P.; "AVALIAÇÃO E CARCATERIZAÇÃO DE ERITROPOETINA HUMAN RECOMBINANTE", p. 1491-1498 . In: Anais do XX Congresso Brasileiro de Engenharia Química - COBEQ 2014 [= Blucher Chemical Engineering Proceedings, v.1, n.2]. São Paulo: Blucher, 2015.
ISSN 2359-1757, DOI 10.5151/chemeng-cobeq2014-1077-21197-141617

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