Blucher Chemical Engineering Proceedings
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COMPARAÇÃO DE MEIOS DE CULTURA PARA PRODUÇÃO DO HÍBRIDO PspA-FL-PdT RECOMBINANTE EM Escherichia coli
COMPARAÇÃO DE MEIOS DE CULTURA PARA PRODUÇÃO DO HÍBRIDO PspA-FL-PdT RECOMBINANTE EM Escherichia coli
ZANE, L; ARAÚJO, S. C; CRIVELLENTI, M. C; GONÇALVES, V. M
Pôster:
O objetivo do trabalho foi avaliar, empregando diferentes meios de cultura, a produção em Escherichia coli BL21 (DE3) Rosetta da molécula híbrida recombinante PspA-FL-PdT, um candidato vacinal para Streptococcus pneumoniae. Foram utilizados os meios definidos HDFGlu e HDFGly, induzidos por IPTG, o meio definido de autoindução SDAB e o meio complexo de autoindução com fitona (AIPhy). Os cultivos foram mantidos sob agitação de 250 RPM e 30°C durante a indução. Amostras foram retiradas para acompanhamento do crescimento e avaliação da produção da proteína recombinante, a qual foi feita por SDS-PAGE e densitometria das bandas do gel. O melhor resultado foi encontrado no cultivo realizado com o meio HDFGly, apresentando produção de 64 mg/L de PspA-FL-PdT. Quando comparados outros parâmetros, o HDFGly também apresenta vantagens, como maior produção em relação ao custo e tempo de cultivo.
O objetivo do trabalho foi avaliar, empregando diferentes meios de cultura, a produção em Escherichia coli BL21 (DE3) Rosetta da molécula híbrida recombinante PspA-FL-PdT, um candidato vacinal para Streptococcus pneumoniae. Foram utilizados os meios definidos HDFGlu e HDFGly, induzidos por IPTG, o meio definido de autoindução SDAB e o meio complexo de autoindução com fitona (AIPhy). Os cultivos foram mantidos sob agitação de 250 RPM e 30°C durante a indução. Amostras foram retiradas para acompanhamento do crescimento e avaliação da produção da proteína recombinante, a qual foi feita por SDS-PAGE e densitometria das bandas do gel. O melhor resultado foi encontrado no cultivo realizado com o meio HDFGly, apresentando produção de 64 mg/L de PspA-FL-PdT. Quando comparados outros parâmetros, o HDFGly também apresenta vantagens, como maior produção em relação ao custo e tempo de cultivo.
Palavras-chave:
DOI: 10.5151/cobeq2018-PT.0912
Referências bibliográficas
- [1] ARAÚJO SC, KRASCHOWETZ S, FIGUEIREDO DB, MIYAJI, EM, GONÇALVES VM.
- [2] Analysis of the production of a pneumococcal hybrid molecule with flexible linker using
- [3] Escherichia coli Rosetta DE3. 2017. Anais do XXI Simpósio Nacional de Bioprocessos e XII
- [4] Simpósio de Hidrólise Enzimática de Biomassas, v. 2, p. 55517, 2017.
- [5] BLOMMEL PG, BECKER KJ, DUVNJAK P, FOX BG. Enhanced bacterial protein expression
- [6] during auto-induction obtained by alteration of lac repressor dosage and medium composition.
- [7] Biotechnol. Prog., v. 23, p. 585-598, 2007.
- [8] CAMPANI G, SANTOS MR, SILVA GG, HORTA ACL, BADINO AC, GIORDANO RC,
- [9] GONÇALVES VM, ZANGIROLAMI TC. Recombinant protein production by engineered
- [10] Escherichia coli in a pressurized airlift bioreactor: A techno-economic analysis. Chem. Eng.
- [11] Process, v. 103, p. 63-69, 2016.
- [12] CARVALHO RJ, CABRERA-CRESPO J, TANIZAKI MM, GONÇALVES VM. Development
- [13] of production and purification processes of recombinant fragment of pneumococcal surface
- [14] protein A in Escherichia coli using different carbon sources and chromatography sequences. Appl.
- [15] Microbiol. Biotechnol., v. 94, 683-694, 2012.
- [16] DE MEY M, DE MAESENEIRE S, SOETAERT W, VANDAMME E. Minimizing acetate
- [17] formation in E. coli fermentations. J Ind. Microbiol. Biotechnol., v. 34, p. 689-700, 2007.
- [18] HANSEN R, ERIKSEN NT. Activity of recombinant GST in Escherichia coli grown on glucose
- [19] and glycerol. Process Biochem., v. 42, p. 1259-1263.2, 2007.
- [20] KORZ DJ, RINAS U, HELLMUTH K, SANDERS EA, DECKWER WD. Simple fed-batch
- [21] technique for high cell density cultivation of Escherichia coli. J. Biotechnol., v. 39(1), p. 59-65,
- [22] 1995.
- [23] LAEMMLI UK, BEGUIN F, GUJER-KELLENBERGER G. A factor preventing the major head
- [24] protein of bacteriophage T4 from random aggregation. J. Mol. Biol., v. 47, p. 69-74, 1970.
- [25] STUDIER FW. Protein production by auto-induction in high-density shaking cultures. Protein
- [26] Expr. Purif., v. 41, p. 207-234, 2005.
- [27] VAZ M. Estudo do cultivo de dois clones de Escherichia coli recombinante (elF, LACK) para
- [28] expressão de antígenos da Leishmania chagasi. Dissertação (Mestrado em Engenharia Química).
- [29] Departamento de Engenharia Química, Universidade Federal do Rio Grande do Norte. Natal.
- [30] 2008.
Como citar:
ZANE, L; ARAÚJO, S. C; CRIVELLENTI, M. C; GONÇALVES, V. M; "COMPARAÇÃO DE MEIOS DE CULTURA PARA PRODUÇÃO DO HÍBRIDO PspA-FL-PdT RECOMBINANTE EM Escherichia coli", p-3454-3457.
In: .
São Paulo: Blucher,
2018.
ISSN 23591757,
DOI 10.5151/cobeq2018-PT.0912
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L ZANE, S. C ARAÚJO, M. C CRIVELLENTI, V. M GONÇALVES, COMPARAÇÃO DE MEIOS DE CULTURA PARA PRODUÇÃO DO HÍBRIDO PspA-FL-PdT RECOMBINANTE EM Escherichia coli, Blucher Chemical Engineering Proceedings, Volume 1, 2018, Pages 3454-3457, ISSN 23591757, http://dx.doi.org/10.5151/cobeq2018-PT.0912 (www.proceedings.blucher.com.br/article-details/comparao-de-meios-de-cultura-para-produo-do-hbrido-pspa-fl-pdt-recombinante-em-escherichia-coli-29299) Palavras-chave:: ;