MODIFICAÇÃO QUÍMICA DE LECITASE ULTRA EM FASE SÓLIDA: EFEITO DO PROTOCOLO DE IMOBILIZAÇÃO (um espaço) (um espaço)

MODIFICAÇÃO QUÍMICA DE LECITASE ULTRA EM FASE SÓLIDA: EFEITO DO PROTOCOLO DE IMOBILIZAÇÃO (um espaço) (um espaço)

SANTOS, J. C. S. DOS; GARCIA-GALÁN, C.; BARBOSA, O.; SANT''ANA, H. B.; FERNÁNDEZ-LAFUENTE, ROBERTO; GONÇALVES, L. R. B.

Artigo:

Lecitase Ultra foi imobilizada por meio de duas estratégias diferentes: ligação covalente em brometo de cianogênio-agarose e por ativação interfacial em octil-agarose. Os derivados foram submetidos a diferentes modificações químicas (aminação, glutaraldeído ou ácido 2,4,6-trinitrobenzensulfonic (TNBS)), a fim de verificar o efeito nas propriedades catalíticas das enzimas imobilizadas. A modificação com glutaraldeído da enzima imobilizada ou modificada e aminada permitiu melhorar a estabilidade da enzima imobilizada, tanto em pH7 e 9 (em torno de 10 vezes), mas apenas a enzima aminada melhorou a estabilidade em pH5. A aminação melhorou a estabilidade de octil-Lecitase, ao mesmo tempo em que reduziu a estabilidade da imobilizada por covalência. E a modificação com TNBS apenas melhora a estabilidade da enzima imobilizada covalentemente, por um fator de 10 vezes, em pH9.

Lecitase Ultra foi imobilizada por meio de duas estratégias diferentes: ligação covalente em brometo de cianogênio-agarose e por ativação interfacial em octil-agarose. Os derivados foram submetidos a diferentes modificações químicas (aminação, glutaraldeído ou ácido 2,4,6-trinitrobenzensulfonic (TNBS)), a fim de verificar o efeito nas propriedades catalíticas das enzimas imobilizadas. A modificação com glutaraldeído da enzima imobilizada ou modificada e aminada permitiu melhorar a estabilidade da enzima imobilizada, tanto em pH7 e 9 (em torno de 10 vezes), mas apenas a enzima aminada melhorou a estabilidade em pH5. A aminação melhorou a estabilidade de octil-Lecitase, ao mesmo tempo em que reduziu a estabilidade da imobilizada por covalência. E a modificação com TNBS apenas melhora a estabilidade da enzima imobilizada covalentemente, por um fator de 10 vezes, em pH9.

Palavras-chave:

DOI: 10.5151/chemeng-cobeq2014-0314-26051-188669

Referências bibliográficas

• [1] BRADFORD, M.M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein dye binding. Anal. Biochem, v.72, p. 248–254, 1976.
• [2] CARRAWAY, K.L.; SPOERL, P.; KOSHLAND JR., D.E. Carboxyl group modification in chymotrypsin and chymotrypsinogen. J. Mol. Biol., v. 42, p. 133–137, 1969.
• [3] DE MARIA, L.; VIND, J.; OXENBØLL, K. M.; SVENDSEN, A.; PATKAR, S. Phospholipases and their industrial applications. Appl. Microb. Biotechnol., v. 74, p. 290–300, 2007.
• [4] FERNÁNDEZ-LORENTE, G.; PALOMO,J.M.; CABRERA, Z.; GUISÁN, J.M.; FERNÁNDEZ-LAFUENTE, R. Specificity enhancement towards hydrophobic substrates by immobilization of lipases by interfacial activation on hydrophobic supports. Enz. Microb. Technol., v. 41, p. 565–569, 2007.
• [5] GALVIS, M.; BARBOSA, O.; TORRES, R.; ORTIZ, C.; FERNANDEZ-LAFUENTE, R. Effect of solid-phase chemical modification on the features of the lipase from Thermomyces lanuginosus. Process. Biochem., v. 47, p.460–466, 2012.
• [6] GARCIA-GALANA, C.; SANTOS, J.C.S.; BARBOSA, O.; TORRES, R.; PEREIRA, E. B.; CORBERAN, V. C.; GONÇALVES, L.R.B.; FERNANDEZ-LAFUENTE, R. Tuning of Lecitase features via solid-phase chemical modification: Effect of the immobilization protocol. Process. Biochem., v.49, p. 604–616, 2014.
• [7] MENDES, A. A.; CASTRO, H. F.; RODRIGUES, D. S.; ADRIANO, W. S.; TARDIOLI, P. W.; MAMMARELLA, E. J.;GIORDANO, R.C.; GIORDANO, R. L. C. Multipoint covalent immobilization of lipase on chitosan hybrid hydrogels: influence of the polyelectrolyte complex type and chemical modification on the catalytic properties of the biocatalysts. J. Ind. Microbiol. Biotechnol., v. 38, p.1055–1066, 2011.
• [8] RODRIGUES, R.C.; BERENGUER-MURCIA, A.; FERNANDEZ-LAFUENTE, R. Coupling chemical modification and immobilization to improve the catalytic performance of enzymes. Adv. Synth. Catal, v. 353, p. 2216–2238, 2011.

Como citar:

SANTOS, J. C. S. DOS; GARCIA-GALÁN, C.; BARBOSA, O.; SANT''ANA, H. B.; FERNÁNDEZ-LAFUENTE, ROBERTO; Luciana R. B. Gonçalves; "MODIFICAÇÃO QUÍMICA DE LECITASE ULTRA EM FASE SÓLIDA: EFEITO DO PROTOCOLO DE IMOBILIZAÇÃO (um espaço) (um espaço)", p-464-471. In: Anais do XX Congresso Brasileiro de Engenharia Química - COBEQ 2014 [= Blucher Chemical Engineering Proceedings, v.1, n.2]. São Paulo: Blucher, 2015.
ISSN 23591757, DOI 10.5151/chemeng-cobeq2014-0314-26051-188669