VETOR LENTIVIRAL PCCLCHIMP47 - TERAPIA GÊNICA PARA PACIENTES COM DOENÇA GRANULOMATOSA CRÔNICA DEVIDO A DEFICIÊNCIA DA P47- PHOX - ESTUDO PRÉ-CLÍNICO

VETOR LENTIVIRAL PCCLCHIMP47 - TERAPIA GÊNICA PARA PACIENTES COM DOENÇA GRANULOMATOSA CRÔNICA DEVIDO A DEFICIÊNCIA DA P47- PHOX - ESTUDO PRÉ-CLÍNICO

Santilli, Giorgia; Aragão Filho, Walmir Cutrim; Schejtman, Andrea; Weisser, Maren; Zinicola, Marta; Thomas, David; Condino-Neto, Antonio; Thrasher, Adrian

Artigo:

Justificativa

O sistema NADPH oxidase é um complexo enzimático gerador desuperóxido. Defeitos na expressão de um de seus componentes originam a DoençaGranulomatosa Crônica (DGC). O transplante alogênico de células-troncohematopoéticas é o tratamento de escolha para os pacientes DGC, mas só estádisponível a 1/3 dos pacientes. Constata-se assim a necessidade dodesenvolvimento de uma terapia alternativa ao transplante alogênico, a qual,pode ser baseada em terapia gênica.

Objetivo(s)

Desenvolver um vetor lentiviral para o tratamento de pacientes comDGC, devido à mutações no gene NCF1 (codificador da p47-phox, componente daNADPH) e testar sua eficiência pré-clínica.

Método(s)

Desenvolvemos um vetor lentiviral (pCCLchimP47) que contém opromotor mielóide quimérico, Catepsina G/c-fes, e uma versão otimizada daregião codificadora do gene p47-phox humano. Introduzimos este vetor em ummodelo murino deficiente para a p47-phox (DGC p47-phox), em granulócitosobtidos a partir de células PLB985 p47- phox-/- e em macrófagos derivados demonócitos (MDM) obtidos de amostras de sangue de pacientes DGC p47-phox-/-. Aatividade da NADPH oxidase (teste de Dihidrorodamina - DHR) e a expressão daproteína p47-phox foram analisadas nos diferentes modelos experimentais. CAAE:39709214.8.0000.5467.

Resultado(s)

O pCCLchimP47 promoveu reconstituição da atividade da NADPHoxidase (de longo prazo, 6 meses após tratamentos) e expressão da p47-phox comgrande especificidade a granulócitos do modelo murino. Os resultados dereconstituição da atividade da NADPH oxidase e expressão da p47-phox tambémforam observados nos granulócitos obtidos a partir de células PLB985p47-phox-/- e MDM obtidos a partir do sangue de pacientes DGC p47-phox-/-.

Conclusão (ões)

Ovetor lentiviral pCCLchimP47 é uma ferramenta promissora para a aplicaçãoclínica da terapia gênica em pacientes com DGC p47-phox-/-. Apoio financeiroFAPESP (2014/01962-3).

Justificativa

O sistema NADPH oxidase é um complexo enzimático gerador desuperóxido. Defeitos na expressão de um de seus componentes originam a DoençaGranulomatosa Crônica (DGC). O transplante alogênico de células-troncohematopoéticas é o tratamento de escolha para os pacientes DGC, mas só estádisponível a 1/3 dos pacientes. Constata-se assim a necessidade dodesenvolvimento de uma terapia alternativa ao transplante alogênico, a qual,pode ser baseada em terapia gênica.

Objetivo(s)

Desenvolver um vetor lentiviral para o tratamento de pacientes comDGC, devido à mutações no gene NCF1 (codificador da p47-phox, componente daNADPH) e testar sua eficiência pré-clínica.

Método(s)

Desenvolvemos um vetor lentiviral (pCCLchimP47) que contém opromotor mielóide quimérico, Catepsina G/c-fes, e uma versão otimizada daregião codificadora do gene p47-phox humano. Introduzimos este vetor em ummodelo murino deficiente para a p47-phox (DGC p47-phox), em granulócitosobtidos a partir de células PLB985 p47- phox-/- e em macrófagos derivados demonócitos (MDM) obtidos de amostras de sangue de pacientes DGC p47-phox-/-. Aatividade da NADPH oxidase (teste de Dihidrorodamina - DHR) e a expressão daproteína p47-phox foram analisadas nos diferentes modelos experimentais. CAAE:39709214.8.0000.5467.

Resultado(s)

O pCCLchimP47 promoveu reconstituição da atividade da NADPHoxidase (de longo prazo, 6 meses após tratamentos) e expressão da p47-phox comgrande especificidade a granulócitos do modelo murino. Os resultados dereconstituição da atividade da NADPH oxidase e expressão da p47-phox tambémforam observados nos granulócitos obtidos a partir de células PLB985p47-phox-/- e MDM obtidos a partir do sangue de pacientes DGC p47-phox-/-.

Conclusão (ões)

Ovetor lentiviral pCCLchimP47 é uma ferramenta promissora para a aplicaçãoclínica da terapia gênica em pacientes com DGC p47-phox-/-. Apoio financeiroFAPESP (2014/01962-3).

Palavras-chave:

DOI: 10.5151/cissi2020-48

Referências bibliográficas

• [1]

Como citar:

Santilli, Giorgia ; Aragão Filho, Walmir Cutrim ; Schejtman, Andrea ; Weisser, Maren ; Zinicola, Marta ; Thomas, David ; Condino-Neto, Antonio ; Thrasher, Adrian ; "VETOR LENTIVIRAL PCCLCHIMP47 - TERAPIA GÊNICA PARA PACIENTES COM DOENÇA GRANULOMATOSA CRÔNICA DEVIDO A DEFICIÊNCIA DA P47- PHOX - ESTUDO PRÉ-CLÍNICO", p-95-96. In: Anais do 4º Congresso Internacional Sabará de Saúde Infantil. São Paulo: Blucher, 2020.
ISSN 23577282, DOI 10.5151/cissi2020-48